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    • BMSCs 向心肌分化的基因表達譜分析

      目的 分析hBMSCs 經5- 氮雜胞苷(5-azacytidine,5-aza)誘導向心肌樣細胞分化過程中基因表達譜的改變。 方法 取胸外科非血液病患者手術中廢棄的肋骨骨髓分離培養hBMSCs,5-aza 誘導第2 代hBMSCs。取誘導前及誘導后的細胞,免疫細胞化學法檢測α-actin、肌鈣蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和連接蛋白43(connexin 43)表達,流式細胞儀檢測cTnT 陽性細胞百分率;利用人表達譜基因芯片技術篩選分化過程中的差異表達基因,對部分基因進行功能分類和分層聚類分析。 結果 hBMSCs 經5-aza 誘導后,部分呈肌細胞樣形態。免疫細胞化學染色檢測示誘導前細胞α-actin、cTnT 染色呈弱陽性,connexin 43 染色呈陰性;誘導后3 周細胞α-actin、cTnT、connexin 43 染色均呈陽性。流式細胞儀檢測示誘導前cTnT 陽性細胞百分率為7.43% ± 0.02%,誘導后3 周為49.64% ± 0.05%。分化過程中共檢測到1 814 個顯著差異表達基因,對其中647 個基因分層聚類,聚為5 類,生物功能包括信號傳導、細胞代謝、增殖分化、發育以及形態發生等。 結論 hBMSCs 經5-aza 誘導向心肌樣細胞分化過程受信號傳導通路、轉錄基因、生長因子等多種因素在不同時間點上的共同調控。

      發表時間:2016-08-31 04:23 導出 下載 收藏 掃碼
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